Тесты VDPro Bovine Leukosis Ab b-ELISA на выявление лейкоза КРС (упаковка 480шт)

Вирус лейкоза крупного рогатого скота (BLV) - это ретровирус, который может вызывать лимфосаркому у крупного рогатого скота. Вирус находится в лимфоцитах крови, где циркулирующие антитела не в состоянии его нейтрализовать. Таким образом, как только животное заражается BLV, оно заражается на всю жизнь.

BLV экономически значим для производителя из-за преждевременной выбраковки или смерти в результате лимфосаркомы. Другой проблемой является запрет на использование туш при убое, что оказывает значительное экономическое воздействие на молочную промышленность и животноводство. Потери от экспортных ограничений являются еще одним экономическим фактором - опасение заражения BLV. Страны, в которых действуют программы борьбы с лейкозом крупного рогатого скота, требуют сертификации на отсутствие BLV перед отправкой крупного рогатого скота в их регионы. Более того, экспортеры спермы находятся под растущим давлением, требуя гарантировать, что их продукция получена от животных, не зараженных BLV, в стадо, свободное от BLV.

VDPro® b-ELISA при лейкозе крупного рогатого скота Ab предназначен для выявления присутствия антител к gp51 BLV в сыворотке крови крупного рогатого скота. Образец добавляется к антигену BLV Планшете с покрытием с последующей инкубацией mAb (конъюгата HRPO против BLV). Если в образце присутствуют антитела, специфичные к BLV gp51, то хромогенный сигнал от субстрата исчезнет. Результат рассчитывается с использованием процентного соотношения образца к отрицательному контролю (процентное соотношение S/N).

Особенности:

• Экономия затрат за счет использования полосовой пластины
• Готовый к использованию реагент, простой тест

Процесс приготовления к исследованию:

1. Перед использованием всем реагентам необходимо дать остыть до комнатной температуры (20~25 ℃). Смешайте реагенты, слегка взбалтывая.
2. Приготовление однократного промывочного буфера
1. Аккуратно встряхните 10-кратный промывочный буфер [2].
2. Разбавьте 1 часть 10-кратного промывочного буфера [2] 9-ю частями деионизированной воды. Разбавленный 1-кратный промывочный буфер стабилен в течение 2 недель при комнатной температуре (20~25℃).
3. Подготовка образцов
1. Используйте образцы сыворотки как можно более свежими
2. Используйте свежие образцы для достижения наилучшего результата. Образцы сыворотки можно хранить при температуре 2 ~8ºC менее 3 дней или при температуре -20℃ в течение более длительного периода. Не замораживать и многократно размораживайте образцы сыворотки. Сыворотки с гемолизом или бактериальным загрязнением не подходят для анализа!
3. Видимые твердые вещества в образцах сыворотки должны быть отделены центрифугированием.
4. Образцы, разбавление положительным контролем и отрицательным контролем
1. Подготовьте планшет для разведения (96-луночный, не прилагается в комплекте поставки) или подходящие пробирки.
2. Разведите 60мкл тестируемой сыворотки, положительной (PC [5]) и Отрицательный (NC [6]) контроль с разбавлением 60мкл Буфер [3] в углублении для пластины или подходящей пробирке.
3. Разбавленные образцы и PC, NC следует смешать перед нанесением на покрытую антигенным материалом тарелку [1].
5. Подложку TMB [7] перед использованием следует прогреть в течение 30 минут при комнатной температуре (20~25 ℃) (10мл/пластина). При хранении при низкой температуре цвет может плохо проявляться.

Исследование:

1. Извлеките пластинку, покрытую антигеном BLV [1], из пакета из защитной фольги.
2. Добавьте по 100мкл разведенной пробы сыворотки в каждую лунку планшета, сохраняя лунки A1 и A2 в течение Положительный контроль (PC, [5]) и лунки B1 и B2 для Отрицательный контроль (NC, [6]). Соблюдайте осторожность, чтобы не переливать образцы из скважины в скважину.
3. Добавьте 100мкл разбавленного положительного контроля (PC, [5]) и Отрицательный (NC, [6]) контроль в указанных скважинах.
4. Накройте пластину прилагаемой герметизирующей пленкой [9].
5. Инкубируйте пластину в течение одного часа (±2 мин) при температуре 37 ℃.
6. Промойте каждую лунку 3 раза 1X промывочным буфером (300мкл на скважину). И удаляйте содержимое лунки на каждом этапе промывки. После окончательной промывки слегка промокните тарелку бумажным полотенцем, чтобы удалить раствор.
7. Добавьте по 100мкл конъюгата HRPO Anti-BLV (готового к применению, [4]) в каждую лунку.
8. Накройте пластину прилагаемой герметизирующей пленкой [9].
9. Инкубируйте пластину в течение одного часа (±2 мин) при температуре 37 ℃.
10. Вымойте тарелку, как описано в шаге 6.
11. Добавьте по 100г субстрата TMB [7] в каждую лунку.
12. Накройте пластину прилагаемой герметизирующей пленкой [9].
13. Инкубируйте пластину в течение 10 минут (±1 мин) при комнатной температуре (20 ~ 25 ℃). Защищайте пластину от прямого воздействия света.
14. Добавьте по 50мкл стоп-раствора [8] в каждую лунку планшета. Слегка встряхните тестовую пластину (5 ~ 10 секунд). Будьте осторожны, чтобы не пролить.
15. Немедленно измерьте и запишите значение A (450 нм) для образцов и контрольных образцов.
16. Подтвердите и рассчитайте результаты по таблице из руководства по использованию.

Содержание набора:

[1] Тарелка, покрытая антигенным материалом BLV - 5 шт
[2] 10-кратный промывочный буфер - 1 флакон 240 мл
[3] Буфер для разбавления - 1 флакон 60 мл
[4] HRPO Anti-BLV конъюгат - 1 флакон 70 мл
[5] Положительный контроль PC - 1 флакон 2 мл
[6] Отрицательный контроль NC - 1 флакон 2 мл
[7] Субстрат TMB - 1 флакон 70 мл
[8] Стоп-раствор - 1 флакон 40 мл
[9] Запаечная пленка - 5 шт
[10] Руководство по эксплуатации - 1 шт